使用NADH氧化酶（NOX）測試盒時，需特別注意反應體系的穩(wěn)定性。下是NADH氧化酶（NOX）測試盒使用時的關鍵注意事項，綜合了不同檢測方法的通用要點：

一、樣本處理與保存

?樣本類型?

組織樣本需按1:5-10比例（g/mL）加入提取液，冰浴勻漿后4℃ 16,000 g離心20分鐘取上清?

細胞/細菌樣本建議500萬細胞/mL提取液，冰浴超聲破碎（300 W，3秒間隔7秒，總3分鐘）后離心?

血清樣本室溫靜置2小時或4℃過夜后離心，避免反復凍融?

?保存條件?

上清液需立即檢測或-80℃保存，避免反復凍融導致酶活性下降?

二、試劑與儀器準備

?試劑平衡?

試劑盒使用前需室溫平衡20分鐘，濃縮洗滌液結晶需水浴溶解?

檢測溶液A/B需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免長時間放置失效?

?儀器校準?

移液器需定期校準（推薦0.5-10μL、20-200μL多規(guī)格）?

酶標儀波長設置需匹配檢測方法（如比色法540-550nm）?

三、操作關鍵點

?反應條件?

37℃孵育時間需嚴格按說明書（如20分鐘），溫度波動需<±0.5℃?

顯色反應需避光（如Griess試劑法），5-20分鐘內完成讀數(shù)?

?干擾控制?

避免使用含EDTA的樣本緩沖液，可能抑制酶活性?

標準品需梯度稀釋，S0孔作為空白對照?

四、數(shù)據(jù)解讀

?結果計算?

樣本稀釋倍數(shù)需在最終結果中乘回（如說明書稀釋5倍則結果×5）?

超出線性范圍需稀釋后復測?

?質控要求?

每批次實驗需包含陽性/陰性對照?

顯色后60分鐘內完成檢測，避免顏色衰減?