【目的】快速檢測(cè)產(chǎn)赭曲霉毒素 A (OTA)的黑曲霉。

【方法】ELISA試劑盒價(jià)格根據(jù)黑曲霉(Aspergillus niger) CBS53.88 中 An5g07920 基因編碼聚酮合酶的?；D(zhuǎn)移酶(AT)域設(shè)計(jì)引物，建立針對(duì)產(chǎn) OTA 黑曲霉的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)方法。

【結(jié)果】對(duì) 72 株曲霉屬菌株(黑曲霉、炭黑曲霉、赭曲霉、佩特曲霉、寄生曲霉和塔賓曲霉)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)產(chǎn) OTA 的黑曲霉能夠擴(kuò)增出特異性條帶，而產(chǎn) OTA 的其它菌株不能擴(kuò)增出條帶；檢測(cè)出 3 株假陽(yáng)性的產(chǎn) OTA 黑曲霉，實(shí)時(shí)定量 PCR 分析此 3 株菌中 An5g07920 的同源基因表達(dá)情況，ELISA試劑盒價(jià)格發(fā)現(xiàn)在產(chǎn)毒條件下可正常表達(dá)，排除了因基因無(wú)法表達(dá)導(dǎo)致假陽(yáng)性的可能。

本方法的檢測(cè)靈敏度為 25 pg 的 DNA 含量，在污染所試農(nóng)產(chǎn)品孢子濃度大于 4.0×04 –4.0×05 個(gè)/g 時(shí)可有效檢測(cè)出產(chǎn)毒菌株。

【結(jié)論】本方法雖會(huì)產(chǎn)生 4% 的假陽(yáng)性結(jié)果，但是仍可作為產(chǎn)毒黑曲霉有效的快速檢測(cè)方法，ELISA試劑盒價(jià)格并在農(nóng)產(chǎn)品污染產(chǎn)毒黑曲霉時(shí)進(jìn)行有效預(yù)警。