在ELISA試劑盒實驗中，選擇各種實驗條件至關(guān)重要，包括：

　　一、固相載體的選擇：許多物質(zhì)可以作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯和聚丙烯。酰胺和纖維素等。其形式可為凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無論什么樣的載體，在使用前都可以進(jìn)行篩選：用等量的抗原包，在同一實驗條件下反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均勻，判斷其吸附性能是否良好。

　　二、包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，純度好，吸附時一般要求PH在9.0-9.6之間。吸附溫度、時間及其蛋白質(zhì)量也有一定的影響，一般采用4℃、8-24小時。蛋白質(zhì)包的較佳濃度需要滴定：用不同的蛋白質(zhì)濃度(0...0和0μg/ml等)包定后，在其他試驗條件相同的情況下，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值較大、蛋白量較少的濃度。大多數(shù)蛋白質(zhì)通常為-0μg/ml。

　　三、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA試劑盒法進(jìn)行初步效果的DDT(見酶標(biāo)記抗體部分)。然后固定其他條件或采用方陣法，正式實驗系統(tǒng)正確滴下其工作濃度。

　　四、酶的底部物質(zhì)和氫化物質(zhì)的選擇：氫化物質(zhì)的選擇要求有明顯的顯色反應(yīng)，但本身沒有顏色。有些氫體(OPD等)具有潛在致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件的人必須使用不致癌、敏感度高的氫氣體。例如TMB和ABTS是目前令人滿意的氫氣體。底部作用一段時間后，應(yīng)加強酸或強堿終止反應(yīng)。通常，底部的作用時間建議是0-30分鐘。底部物質(zhì)的使用液必須新鮮配制，特別是在使用前加入過氧化氫水。（內(nèi)容僅供參考，有問題或遇到問題請在線咨詢，我們會竭誠為您服務(wù)）