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人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒?洗滌方法

發(fā)布時間:2022-11-15      點擊次數(shù):552

人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒洗滌方法:

. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?0μl,余孔分別加標準品或待測樣品00μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育小時。

3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前5分鐘內配制)00μl,加上覆膜,37℃溫育小時。

5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液00μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育5分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞

MM, 小鼠小膠質細胞

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞

MN-c, 小鼠皮質神經(jīng)元

 細胞名稱

人絨毛膜毛細血管內皮細胞

人羊膜上皮細胞

人絨毛間充質成纖維細胞

人羊膜間充質基質細胞

人絨毛膜間充質基質細胞

 細胞名稱

NRK-52E,大鼠腎細胞

H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)

NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系

大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系

CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞

SF9, 昆蟲卵巢細胞

BRL 3A, 大鼠肝正常細胞

HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞

HET-A, 人食管上皮細胞

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

GC-, 鼠精原細胞

293A,人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別)

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞

293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系

EPC, 大鼠血管內皮祖細胞

HBE, 正常人支氣管上皮細胞系

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞

HUVEC-2, 人臍靜脈血管內皮細胞系

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞


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