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國產(chǎn)ELISA試劑盒競賽法

發(fā)布時間:2022-11-15      點擊次數(shù):528

國產(chǎn)ELISA試劑盒競賽法檢查抗原
當(dāng)小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個以上的抗體位點,因而不能用雙抗體夾心法進行測定,能夠選用競賽法形式。辦法的基本原理可見圖2,經(jīng)洗刷后分成兩組:一組加酶符號抗原和被測抗原的混合液,而另一組只加酶符號抗原,再經(jīng)孵育洗刷后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為所要測定的不知道抗原的量。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
競賽法的扼要操作過程:
)先參加抗體,使抗體固定于載體外表;
2)參加梯度濃度比例的待測樣品與酶標抗原混合物,一同做只加酶標抗原的對照組;
3)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,比照實驗組及對照組的顯色區(qū)別,計算不知道抗原的量。
雙抗原夾心法檢查抗體
雙抗原夾心法的反響形式與雙抗體夾心法相似。用特異性抗原進行包被和制備酶物,以檢查相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不一樣之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因而其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢查常選用本法。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原構(gòu)造的不一樣,尋覓適宜的符號辦法。
雙抗原夾心法的扼要操作過程為:
)先參加抗原,使抗體固定于載體外表;
2)再加樣品,使目標檢查抗體構(gòu)成抗原-抗體復(fù)合物;
3)加酶標抗原;
4)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
間接法檢查抗體
間接法是檢查抗體常用的辦法。其原理為使用酶符號的抗抗體(辣根過氧化物酶符號的兔抗抗體)以檢查與固相抗原的受檢抗體(),故稱為間接法。本法主要用于對病原體抗體的檢查而進行流行癥的確診。間接法的長處是只需改換包被抗原就可使用同一酶標抗抗體樹立檢查相應(yīng)抗體的辦法。
國產(chǎn)ELISA試劑盒間接法的扼要操作過程:
)將特異性抗原與固相載體聯(lián)合,構(gòu)成固相抗原;
2)加稀釋的受檢血清,保溫反響。血清中的特異抗體與固相抗原,構(gòu)成固相抗原抗-體復(fù)合物;3)加酶標抗抗體;
4)參加酶促反響底物,發(fā)作顯色反響,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
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