不可僅做一次標曲！

即使使用同一試劑盒，每次實驗必須重新制作標準曲線，原因如下：

實驗變量不可控：溫濕度波動、酶標板包被均一性、洗板效果、儀器校準差異等均會導(dǎo)致OD值偏移。

試劑穩(wěn)定性限制：稀釋后的標準品易降解（即使分裝凍存），且顯色底物活性隨時間下降。

數(shù)據(jù)可靠性保障：標曲需與樣本同批次處理，避免跨次實驗的系統(tǒng)誤差。此外，實驗人員的操作差異也會對結(jié)果產(chǎn)生影響。即使是經(jīng)驗豐富的實驗員，在加樣速度、混勻力度、孵育時間控制等方面都可能存在細微差別，這些因素都會導(dǎo)致反應(yīng)體系的動態(tài)變化。若沿用舊標曲，這些變量帶來的誤差將直接傳導(dǎo)至樣本濃度計算結(jié)果。

值得注意的是，不同批次的試劑盒組分也存在差異。生產(chǎn)商提供的標準品雖然標稱濃度相同，但實際效價可能存在批間差；酶結(jié)合物的活性、包被抗體的親和力等參數(shù)也會隨批次變化。

對于需要長期監(jiān)測的課題，建議采用"標曲+質(zhì)控品"雙驗證模式。每次實驗除制作新鮮標曲外，還應(yīng)設(shè)置高、中、低三個濃度的質(zhì)控樣本，將其實測值與預(yù)期值比對。若質(zhì)控結(jié)果超出允許范圍（通常為±20%），則需排查試劑失效或操作失誤，必要時重新實驗。這種設(shè)計既能保證單次實驗的準確性，又能實現(xiàn)跨批次數(shù)據(jù)的可比較性。

實驗室管理方面，應(yīng)建立完整的標準曲線檔案。將每次實驗的標曲參數(shù)（R2值、斜率、截距）、質(zhì)控數(shù)據(jù)與環(huán)境溫濕度記錄共同保存，便于追溯異常數(shù)據(jù)。智能化的酶標儀軟件可自動生成這些質(zhì)控圖表，大大提升數(shù)據(jù)管理的規(guī)范性。記住：嚴謹?shù)臉藴是€操作看似增加了工作量，實則是節(jié)省后期數(shù)據(jù)糾錯時間的關(guān)鍵投資。