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      豬瘦素(LEP)ELISA試劑盒

      簡要描述:售后:我公司具有優(yōu)質(zhì)的技術(shù)團隊,豬瘦素(LEP)ELISA試劑盒一旦售出,產(chǎn)品僅用于科研實驗過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時沒有任何的后顧之憂。

      • 產(chǎn)品型號:GOY-3029E
      • 廠商性質(zhì):
      • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
      • 訪  問  量:459

      產(chǎn)品分類

      Product Category
      查看全部

      詳細(xì)介紹

      產(chǎn)品屬性:

      產(chǎn)品名稱

      英文名稱

      規(guī)格

      貨號

      豬瘦素(LEP)ELISA試劑盒

      Porcine Leptin, LEP Elisa Kit

      48T/96T

      GOY-3029E

      實驗原理:

      本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬瘦素(LEP)水平。用純化的豬瘦素(LEP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入豬瘦素(LEP),再與HRP標(biāo)記的豬瘦素(LEP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬瘦素(LEP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬瘦素(LEP)濃度。 

      試劑盒組成

      1

      30倍濃縮洗滌液

      20ml×1

      7

      終止液

      6ml×1

      2

      酶標(biāo)試劑

      6ml×1

      8

      標(biāo)準(zhǔn)品(80pg/ml

      0.5ml×1

      3

      標(biāo)包被

      12×8

      9

      標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      1.5ml×1

      4

      樣品稀釋液

      6ml×1

      10

      說明書

      1

      5

      顯色劑A

      6ml×1

      11

      封板膜

      2  

      6

      顯色劑B

      6ml×1/

      12

      密封袋

      1

      試劑配制:

      1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。

      2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。

      3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

      4、標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

      5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

      6、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

      7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

      8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

      9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

      10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

      1.jpg


      操作步驟

      1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      40pg/ml

      5號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      20pg/ml

      4號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      10pg/ml

      3號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      5pg/ml

      2號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      2.5pg/ml

      1號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

       

      2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3.溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。   

      4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 

      7.溫育:操作同3。

      8.洗滌:操作同5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色10分鐘.

      10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

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