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兔抗內皮細胞抗體(AECA)elisa試劑盒組成及試劑配制

發(fā)布時間:2023-03-15      點擊次數:435

兔抗內皮細胞抗體(AECA)elisa試劑盒組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 

2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。

如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。

7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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